人重组激活基因2试剂盒 RAG2elisa试剂盒 仑昌硕生物

仑昌硕生物  人重组激活基因2（RAG-2）elisa试剂盒 

厦门仑昌硕生物科技有限公司集研发、生产、销售、服务及品牌代理为一体的生物技术公司，目前可提供各种抗体、免疫学相关的检测试剂盒、胎牛血清，动物抗血清等高品质产品及服务，涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学领域。公司非常注重企业信息化的建设及企业平台的建设，我们内部采用了先进的信息处理平台，保证客户的需求可以准确、有效处理。公司成立之初，立足外贸，和部分欧美及亚非国的客户建立了良好的合作，随着国内生物领域的蓬勃发展，逐步把重心转移到国内来，为每位科研人员献上高品质的产品及服务是我们的使命。

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 1. 包被抗原：用包被液将抗原作适当稀释, 一般为1～10微克/孔，每孔加200微升，37℃温育1小时后，4℃冰箱放置16～18小时。

 2. 洗涤：倒尽板孔中液体，加满洗涤液，静放三分钟，反复三次，将反应板颠倒在吸水纸上，使孔中洗涤液流尽。

3. 加封闭液200微升，37℃放置一小时。

4. 洗涤同2。

5. 加被检血清：用稀释液将被检血清作几种稀释,，每孔200微升。同时作稀释液对照。37℃放置2小时。

6. 洗涤同2。

7. 加辣根过氧化物酶羊抗兔IgG, 每孔200微升, 放置37℃ 1小时。

8. 洗涤同2。

9. 加底物：邻*二胺溶液加200ml，室温暗处10--15分钟。

10. 加终止液：每孔50微升。

11. 观察结果：用酶联免疫检测仪记录450nm读数。

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背景:一些实验已经证明在同一载体上构建含多个基因的共表达载体,可提高转染和表达效率.目的:利用多形上皮黏蛋白(polymorphic epithelial mucin,MUC1)多肽骨架中含有许多连续重复系列,构建人MUC1重复序列串联体基因与巨噬细胞集落刺激因子(Granulocyte macrophage colony sfimulating factor,GM-CSF)基因重组的真核共表达质粒pcDNA3.1(+).MUCI-GM-CSF,并观察重组质粒存COS-7细胞中的表达.设计、时间及地点:基因重组体设计实验,于2005-09/2006-12在解放军第四军医大学动物中心实验室完成.材料:真核表达载体pcDNA3.1(+)由英国Taylor-Papadimitriou 教授惠赠.pGEM.3zf(-)-GM-CSF质粒、COS-7细胞、pUC18载体及E.coli DH5 α为自备,雌性BALB/c小鼠由解放军第四军医大学实验动物中心提供.方法:将信号肽及编码MUC1基因片段合成、合成的片断经退火等方法获得MUC1基因重复序列串联体,酶切鉴定及序列分析后,与GM-CSF基因克隆入pcDNA3.1(+)真核表达载体中,构建真核共表达质粒pcDNA3.1(+)-MUC1-GM-CSF.以重组质粒转染COS-7细胞.主要观察指标:通过间接免疫荧光法及ELISA检测目的基因的表达.结果:酶切鉴定及序列分析表明,重组质粒含有人MUC1重复序列串联体与GM-CSF的融合基因,在COS-7细胞中可检测到MUC1表达,重组质粒免疫小鼠可诱导产牛抗GM-CSF抗体.结论:成功构建了人MUC1基因重复序列串联体与免疫佐剂GM-CSF基因重组成为双基因多表位抗原的真核共表达质粒.

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  厦门仑昌硕生物科技有限公司 本公司集研发、生产、销售、服务及品牌代理为体的生物技术公司，目可提供各种抗体、免疫学相关的检测试剂盒、胎牛血清、动物抗血清等高品质产品及服务，涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学域。公司非常注重企业信息化的建设及企业平台的建设，我们内部采用了先进的信息处理平台，保证客户的需求可以准确、有效处理。公司成立之初，立足外贸，和部分欧美及亚非国家的客户建立了良好的合作，随着国内生物域的蓬勃发展，逐步把重心转移到国内来，为每位科研人员献上高品质的产品及服务是我们的使命。

 

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