百萤生物 Biolite Cyber Green核酸凝胶染料 货号Tj1700

 

简要概述Cyber Green 染料是一种绿色荧光核酸染料，可用于qPCR，解链曲线分析，嗜热解旋酶依赖性扩增（tHDA）的实时监测，常规溶液DNA定量和各种凝胶电泳。 DNA结合的Cyber Green 染料的激发和发射光谱非常接近荧光素（FAM）或SYBR®Green，使染料与配备488 nm氩激光的仪器或任何波长区域的可见光激发兼容。 Cyber Green 染料在热和水解方面都非常稳定，在日常处理过程中提供了便利。染料本身基本上是非荧光的，但在与dsDNA结合后变得高度荧光。荧光强度至少比溴化乙锭高一个数量级。此外，DNA / Cyber Green 复合物的荧光量子产率比DNA /溴化乙锭的荧光量子产率高5倍以上。它可以在电泳（预染色）前，以及在电泳（后染色）后使用，并且通过毛细管电泳分离染色DNA。它也常用于分子生物学，不含酶（例如：Taq酶，逆转录酶，内切核酸酶，T4连接酶）抑制，并且不干扰Southern blot(Southern印迹杂交)。 染料特点高灵敏： 至少可检出20pg DNA，高于EB染色法25-100倍信噪比高：样品荧光信号强，背景信号低操作简单：无须脱色或冲洗适用范围广：可适用于多种电泳分析使用方便：不影响其它修饰酶作用经济：价格便宜产品说明书染色方案我们发现通过后染色实现了大的灵敏度，这也消除了染料干扰DNA迁移的可能性。虽然预制方案更方便，但一些DNA样本可能会出现迁移，强烈建议凝胶运行时间不超过2小时。建议使用以下方案。 可能需要进行一些比较以确定哪一个更符合您的需求。 1.后染色方案1.1根据您的标准方案运行凝胶。1.2通过将10,000X储备试剂稀释到PH 7.5  -  8缓冲液中制备1X Cyber Green 工作溶液（例如，TAE，TBE或TE优选pH8.0）。注意：在水中制备的染色溶液不如在缓冲液中制备的染色溶液稳定，必须在24小时内使用，以确保染色灵敏度。另外，在pH低于约7.5或高于8.0的缓冲液中制备的染色溶液不太稳定并且显示出降低的染色效力。1.3将凝胶放入合适的聚丙烯容器中。轻轻加入足量的1X染色溶液浸没凝胶。注意：不要使用玻璃容器，因为它会吸附染色溶液中的大部分染料。1.4在室温下轻轻搅拌凝胶约30分钟，避光。注意：染色溶液可以在黑暗中储存（冷藏）一周，重复使用2-3次。1.5使用254 nm透射仪或使用长路绿色滤光片（如SYBR®滤光片或GelStar®滤光片）的激光凝胶扫描仪对染色的凝胶成像。 2.预染色方案2.1使用标准方案制备琼脂糖凝胶溶液。2.2在浇注凝胶前将10,000X Cyber Green™原液试剂以1：10,000稀释到凝胶溶液中并充分混合。2.3根据您的标准方案运行凝胶。2.4使用254 nm透射仪或使用长路径绿色滤光片（如SYBR®滤光片或GelStar®滤光片）的激光凝胶扫描仪对染色的凝胶成像。 3.电泳前的DNA染色3.1在电泳前，用1：10,000稀释的染料（TE，TBE或TAE）孵育DNA至少15分钟。3.2根据您的标准方案运行凝胶。3.3使用254 nm透射仪或使用长路绿色滤光片（如SYBR®滤光片或GelStar®滤光片）的激光凝胶扫描仪对染色的凝胶成像。

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