睿信生物 小鼠γ干扰素诱导蛋白16p16(IFI16p16)elisa试剂盒

公司介绍     

     生物药物分析方法开发   分析方法验证      高品质科研elisa试剂盒、化学发光试剂盒开发与定制供科研使用，不得用于临床检验。       

产品简介

  小鼠γ干扰素诱导蛋白16p16(IFI16p16)elisa试剂盒研究芪玉三龙汤在Lewis肺癌小鼠体内的抑瘤效应及对共刺激分子程序性死亡蛋白1及配体(PD-1/PD-L1)表达的影响。方法采用Lewis肺癌细胞株培养移植法建立肺癌荷瘤小鼠模型,荷瘤成功后随机分为模型组、化疗组、中药高、中、低剂量组、联合组,每组8只;实验第11天开始中药低、中、高剂量组小鼠分别按(20.12、40.24、80.48)g/(kg·d)灌胃给药,化疗组按照0.4 m L顺铂腹腔注射给药,联合组以高剂量中药灌胃和顺铂腹腔注射联合给药,模型组按照等量生理盐水给药,1次/d,连续给药10 d;检测各组荷瘤小鼠肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线;称取瘤质量,计算抑瘤率;实时定量PCR和Western blot法分别检测荷瘤小鼠PD-1及肿瘤组织PD-L1的mRNA和蛋白水平。结果与模型组比较,中药高剂量组能够抑制肺癌移植瘤生长,抑瘤率为23.86%,联合组与化疗组抑瘤率相当;中药高剂量组能明显降低组织PD-1 mRNA及PD-1蛋白表达,抑制肿瘤组织PD-L1 mRNA及蛋白表达。联合组PD-1、PD-L1蛋白水平明显低于化疗组,但对其他指标的交互作用无统计学意义。结论芪玉三龙汤能通过降低PD-1/PD-L1水平温和抑制肺癌移植瘤生长。观察苗药香囊对正常小鼠肺泡灌洗液中分泌型免疫球蛋白A(SIgA)、免疫球蛋白G1(IgG1)及肺组织中免疫球蛋白A(IgA)、IgG1的影响.方 法 雄性昆明小鼠50只,随机分为5组(每组10只):空白对照组、玉屏风颗粒组(阳性对照组)、苗药香囊持续吸入组、苗药香囊间断吸入组、苗药香囊持续吸 入+玉屏风颗粒组(香+玉组).实验小鼠连续用药4周后,采用ELISA法检测肺泡灌洗液中SIgA、IgG1的含量,Western blot分析检测肺组织中IgA、IgG1蛋白的表达.结果 与空白对照组相比,苗药香囊持续吸入组小鼠肺泡灌洗液中SIgA和IgG1含量显著升高,分别为(255.83 ± 94.96) ng/ml和(165.37 ± 54.59) ng/ml,差异具有统计学意义(P < 0.05);苗药香囊持续吸入组小鼠肺组织中IgA、IgG1的相对含量分别为3.90±0.29和2.69±0.89,显著高于空白对照组,差异具有统 计学意义(P < 0.05).结论 苗药香囊能够增加正常小鼠呼吸道中IgA、SIgA和IgG1的含量,进而提高其呼吸道黏膜的免疫功能.

性能特点

小鼠γ干扰素诱导蛋白16p16(IFI16p16)elisa试剂盒胱硫醚β-裂解酶(Cystathionineβ-lyase,CBL)是蛋氨酸生物合成途径中的关键酶,能催化胱硫醚裂解产生同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy),丙酮酸和氨。血浆中Hcy的测定已经成为诊断维生素B_(12)、叶酸缺乏及早期心脑血管等疾病的常用方法。目前,Hcy主要的检测方法之一是酶循环法。该法操作简单,检测速度快,准确度高。CBL是该法测定中的一种关键酶,所以,克隆表达出高活性的CBL并应用于该法是很有意义的。本文通过NCBI数据库搜索CBL基因序列,选择从大肠杆菌K12(E.coli K12)的基因组中扩增CBL目的基因,将基因与质粒载体p ET-28a(+)连接,并转化到表达宿主E.coli BL21 Gold(DE3)plysS中,成功获得重组菌pET-28a-CBL,经IPTG诱导后,可表达大小约为42 kDa的可溶性蛋白,具有高的胱硫醚β-裂解酶(CBL)活性。诱导表达后,将重组菌细胞超声破碎,离心,上清液经融合蛋白纯化试剂盒MagExtractor-His-tag-的Ni亲和纯化,获得一电泳纯的蛋白,比酶活(CBL酶活)可达58.24 U/mg,回收率为48%,纯化倍数为3.66倍。研究表明,重组CBL酶的最适反应pH在8.0-8.5之间,最适反应温度在35℃左右。该酶在15~35℃下比较稳定,保温4h可残留90%以上的相对活性；该酶在p H 8.0-8.5中最稳定,在pH 7.0~8.0之间保温4 h(4℃)均能残留80%以上的活性。1mM的金属离子K~+、Mg~(2+)、Fe~(2+)、Ca~(2+)对CBL活性有不同程度的提高；Co~(2+)、Zn~(2+)、Ni~(2+)对酶活性的有较强的抑制作用。本文研究了重组CBL在酶循环法测定Hcy中的应用。实验结果表明,在三种酶的典型浓度下(CBS=0.014mg/ml、LDH=0.028 mg/ml、CBL=0.04 mg/ml),反应速率与Hcy浓度成良好的线性关系。所用酶适用于循环法测定Hcy。

产品用途

小鼠γ干扰素诱导蛋白16p16(IFI16p16)elisa试剂盒为了提高狂犬病毒抗体检测的灵敏度和特异性，采用狂犬病毒单克隆抗体包被酶标板，再分别加入重组的狂犬病毒糖蛋白或细胞培养抗原做固相层的方法(抗体捕捉法)，用传统的间接ELISA法做对照，按常规方法检测抗狂犬病毒抗体。结果显示，抗体捕捉法的非特异性反应低于间接法，而灵敏度达到0．51U水平，高于间接法。在800份临床标本检测中，检出率明显高于间接法。用15份阳性血清作小鼠中和试验，并和抗体捕捉ELISA法比较具有高度的一致性。试验结果充分表明，该方法优于传统的ELISA间接法。因此可作为临床注射狂犬疫苗后检测血清中狂犬病毒抗体的常规方法。

满足标准

小鼠γ干扰素诱导蛋白16p16(IFI16p16)elisa试剂盒周围T细胞淋巴瘤是一大类异质性大、预后差、对现有治疗方案不敏感的高侵袭性非霍奇金淋巴瘤。目前尚无有效的靶向治疗药物可供选择。维甲酸受体alpha(Retinoic acid receptor alpha,(RARA))是一种转录因子,可介导维甲酸调节细胞生长和分化。维甲酸虽然已经用于一些皮肤T细胞淋巴瘤(Cutaneous T cell lymphoma,CTCL)的治疗,但是机制尚不清楚。我们前期对T细胞淋巴瘤病例二代测序结果发现有部分病例中存在RARA基因突变,如R394Q等。本研究旨在探明RARA在T细胞淋巴瘤中的作用。为此,我们用western blot方法将T细胞淋巴瘤细胞株按照RARA表达程度分为低表达株(Hut78和Karpas299)和高表达株(Mac-1),用MTT法和PI染色分别检测广谱全反式维甲酸(pan-Retinoic acid,RA)和RARA激动剂AM80对三种细胞增殖和细胞周期的影响,用RNA测序分析筛选可能介导RARA对细胞增殖和细胞周期调控的中间蛋白,并用RARA过表达和RARA RNA干涉细胞模型来验证可能的中间蛋白。结果发现RA和AM80对T细胞淋巴瘤细胞株的敏感性依RARA受体表达量的下降而下降,对于RARA表达量低的细胞株,将RARA过表达后细胞株对维甲酸敏感性上调,对RARA表达量高的细胞株,将RARA基因干涉后细胞周期得到抑制,进一步研究发现RARA可通过上调CDK6/4蛋白而促进T细胞淋巴瘤细胞株G1-S期转化和细胞增殖,应用维甲酸后CDK6/4下调,细胞周期抑制,细胞增殖率下降。上述结果显示RARA可通过上调CDK6/4途径促进T细胞淋巴瘤的增殖,而维甲酸有望通过RARA成为T细胞淋巴瘤新的治疗靶点。

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