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起订量
≥200Tests
总供应
200Tests
所在地
陕西省西安市
货号 | 11403 | 存储条件 | f/l |
规格 | 200 Tests | ||
Ex (nm) | 570 | Em (nm ) | 583 |
分子量 | 溶剂 | ||
产品详细介绍 |
简要概述
Amplite 荧光法乙酰胆碱检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测乙酰胆碱酯酶的试剂盒,胆碱是一种强有机碱,是卵磷脂的组成成分,也存在于神经鞘磷脂之中,是机体可变甲基的一个来源而作用于合成甲基的产物,同时又是乙酰胆碱的前体。乙酰胆碱(AcetylCholine,ACh)是一种神经递质,能特异性的作用于各类胆碱受体,在组织内迅速被胆碱酯酶破坏,其作用广泛,选择性不高。在神经细胞中,乙酰胆碱是由胆碱和乙酰辅酶A在胆碱乙酰移位酶(胆碱乙酰化酶)的催化作用下合成的。胆碱和乙酰胆碱在许多生物学过程中发挥重要的作用。Amplite乙酰胆碱检测试剂盒 *红色荧光* 为定量检测胆碱提供了一种灵敏的方法。本试剂盒使用Amplite Red对氧化酶介导的酶偶联反应产物胆碱进行定量检测。Amplite Red的红色荧光强度与胆碱的量成比例关系。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Amplite 荧光法乙酰胆碱检测试剂盒。
产品说明书
样品实验方案
简要概述
1.准备ACh工作溶液(50μL)2.添加ACh标准品或ACh测试样品(50μL)3.在室温下孵育10-30分钟4.监测Ex / Em = 540/590 nm处的荧光强度(截止= 570 nm)
溶液制备
1.储备溶液
所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。1. Amplite 红色储备液(250X):将40μLDMSO(组分E)加入到Amplite Red(组分A)的小瓶中以制备250X Amplite Red原液。
2.乙酰胆碱标准溶液(50 mM):将200μLddH2O加入到乙酰胆碱标准品(组分C)的小瓶中以制备50mM乙酰胆碱标准溶液。
2.标准溶液
乙酰胆碱标准将20μL50mM乙酰胆碱标准溶液加入到980μL测定缓冲液(组分D)中以产生1000μM乙酰胆碱标准溶液。 取1000μM乙酰胆碱标准品,在分析缓冲液(组分D)中进行1:10,得到100μM乙酰胆碱标准品(AS7)。 取100μM乙酰胆碱标准品(AS7)和1:3连续稀释液,用分析缓冲液(组分D)连续稀释乙酰胆碱标准品(AS6-AS1)。 注意:稀释的乙酰胆碱标准溶液不稳定,应在4小时内使用。
3.工作溶液
1.将5mL测定缓冲液(组分D)加入乙酰胆碱探针(组分B)瓶中并充分混合。
2.将20μL250XAmplite Red 储备溶液加入乙酰胆碱探针溶液瓶中,制成乙酰胆碱(ACh)工作溶液。 注意:应立即使用乙酰胆碱(ACh)工作溶液并避光。 测定背景将随着更长的储存时间而增加。
样品分析
表1.实心黑色96孔微孔板中乙酰胆碱标准品和测试样品的布局。 AS =乙酰胆碱标准品(AS1-AS7,0.14至100μM); BL =空白对照; TS =测试样品。
BL | BL | TS | TS |
AS1 | AS1 | ... | ... |
AS2 | AS2 | ... | ... |
AS3 | AS3 | ||
AS4 | AS4 | ||
AS5 | AS5 | ||
AS6 | AS6 | ||
AS7 | AS7 |
表2.每个孔的试剂组成
孔 | 容积 | 试剂 |
AS1-AS7 | 50ul | 连续稀释液(0.14至100μM) |
BL | 50ul | 分析缓冲液 |
TS | 50ul | 测试样本 |
1.根据表1和2中提供的布局制备乙酰胆碱标准品(AS),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。 注意:根据需要处理细胞或组织样本。
2.向乙酰胆碱标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μL乙酰胆碱(ACh)工作溶液,使总乙酰胆碱测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入25μL乙酰胆碱(ACh)工作溶液,总体积为50μL/孔。
3.在室温下孵育反应10至30分钟,避光。
4.用Ex / Em = 540 / 590nm(截止值= 570nm)的荧光酶标仪监测荧光增加。
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级别 : | 超纯、高纯 |
含量 : | 95% |
产品规格 : | 200 Tests |
品牌 : | AAT Bioquest |
用途范围 : | AAT Bioquest生产的荧光染料 |
特色服务 : | 顺丰包邮 免费技术咨询 |
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