aat bioquest Amplite 荧光法L-丙氨酸检测试剂盒 货号13825

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≥200tests

总供应

200tests

所在地

陕西省西安市

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  • 产品属性
  • Amplite 荧光法L-丙氨酸检测试剂盒

    货号13825存储条件                      f/l
    规格                         200 Tests                                      
    Ex (nm)571Em (nm)585
    分子量溶剂
    产品详细介绍

    简要概述

            Amplite 荧光法L-丙氨酸检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测丙氨酸的试剂盒,L-丙氨酸(L-Ala)作为重要蛋白质的构建块起着至关重要的作用。 L-丙氨酸的缺乏通常是营养不良,低蛋白饮食和压力的标志。 AAT Bioquest的Amplite 荧光L-丙氨酸测定试剂盒提供了一种灵敏的荧光测定方法,用于量化生物样品中的L-丙氨酸。 它利用一种酶偶合反应释放过氧化氢,Quest Fluor L-丙氨酸传感器在Ex / Em = 540/590 nm处使用荧光酶标仪进行检测。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Amplite 荧光法L-丙氨酸检测试剂盒。 

    产品说明书

    样品实验方案

    简要概述

    1.准备测试样品以及连续稀释的L-丙氨酸标准品(50 µL)2.加入等体积的L-丙氨酸工作溶液(50 µL)3.在37°C下孵育30分钟至1小时4.监测Ex / Em = 540/590 nm的荧光强度

    溶液制备 

    1.储备溶液

    所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。1.1 Quest Fluor L-丙氨酸传感器储备溶液(200X):将55 µL DMSO(组分E)添加到Quest Fluor L-丙氨酸传感器(组分A)中,制成200X Quest Fluor L-丙氨酸传感器储备溶液。

    1.2 L-丙氨酸标准溶液(1 mM):将10 µL 100 mM L-丙氨酸(组分D)加到990 µL PBS(pH 7.0)中,得到1 mM L-丙氨酸溶液。

    2.标准溶液

    L-丙氨酸标准向900 µL PBS中加入100 µL 1 mM L-丙氨酸标准溶液,制成100 µM L-丙氨酸溶液(AS7)。进行1:2连续稀释以获得连续稀释的L-丙氨酸标准品(AS6-AS1)。

    3.工作溶液

    3.1 将5 mL测定缓冲液(组分C)加入一瓶酶混合1瓶(组分B1)中,并充分混合。

    3.2 将100μLddH2O加入一个酶混合物2小瓶(组分B2)中并充分混合。

    3.3 将整个小瓶(100μL)的Enzyme Mix 2和25 uL的200X L-丙氨酸传感器储备溶液转移到Enzyme Mix 1瓶中; 混合均匀。 注意:工作解决方案不稳定。 立即使用,避免直接暴露在光线下。

    样品操作及实验分析

    表1.黑色96孔微孔板中L-丙氨酸标准品和测试样品的布局。 AS = L-丙氨酸标准品(AS1-AS7,1.5至100 µM); BL =空白对照; TS =测试样品。

    BLBLTSTS
    AS1AS1......
    AS2AS2......
    AS3AS3
    AS4AS4
    AS5AS5
    AS6AS6
    AS7AS7

    表2.每个孔的试剂组成

    容积试剂
    AS1-AS750ul连续稀释(1.5至100 µM)
    BL50ul1X PBS缓冲液
    TS50ul测试样品

    1.根据表1和表2提供的布局,准备L-丙氨酸标准品(AS),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25 µL试剂代替50 µL。

    2.将50 µL L-丙氨酸工作溶液添加到L-Alanine标准品,空白对照和测试样品的每个孔中,以使L-Alanine测定的总体积为100 µL /孔。 对于384孔板,将25 µL L-丙氨酸工作溶液添加到每个孔中,总体积为50 µL /孔。 注意:在pH 6.5至7.0下运行L-丙氨酸测定。

    3.将反应混合物在37°C孵育30分钟至1小时。

    4.使用荧光板读数器在Ex / Em = 540/590 nm(截止:570 nm)下监测荧光的增加。

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    级别 : 超纯、高纯
    含量 : 95%
    产品规格 : 200 Tests
    品牌 : aat bioquest
    用途范围 : AAT Bioquest生产的荧光染料
    特色服务 : 免费技术咨询 顺丰包邮
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