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所在地
陕西省西安市
Amplite 荧光法辅酶A定量试剂盒 绿色荧光
货号 | 15270 | 存储条件 | F/L |
规格 | 200 Tests | 价格 | |
Ex (nm) | 510 | Em (nm) | 524 |
分子量 | 溶剂 | ||
产品详细介绍 |
简要概述
Amplite 荧光法辅酶A定量试剂盒 绿色荧光是美国AAT Bioquest生产的用于检测辅酶A的试剂盒,辅酶A(CoA)是所有形式的细胞生命中的通用和必需的辅因子,在许多生物合成,能量产生和降解途径中充当主要的酰基载体。它在脂肪酸,丙酮酸氧化和柠檬酸循环的合成和氧化中起重要作用。 CoA的测量是研究许多生物系统中的生物过程和事件的基本任务之一。有一些试剂或检测试剂盒可用于定量生物系统中的CoA含量。现有的商业套件要么缺乏灵敏度,要么程序繁琐。我们的Amplite 荧光CoA 定量分析试剂盒提供超灵敏荧光测定法,通过检测CoA中的-SH基团来定量CoA含量。我们在该试剂盒中使用的专有荧光CoA Green 染料在与-SH反应后变为强荧光。该测定试剂盒可在100μL测定体积(40nM)中检测少至4皮摩尔的CoA。它可以在方便的96孔或384孔微量滴定板格式下以Ex / Em = 490 / 520nm进行,并且无需分离步骤即可轻松适应自动化。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Amplite 荧光法辅酶A定量试剂盒。
适用仪器
荧光酶标仪 | |
激发: | 490nm |
发射 | 520nm |
推荐孔板: | 黑色孔板 |
产品说明书
96孔板检测示例
概述
准备CoA测定混合物(50μL)
添加CoA标准品或测试样品(50μL)
在室温下孵育10分钟 - 1小时
监测Ex / Em = 490/520 nm处的荧光增加
注意:在开始实验之前,在室温下解冻所有试剂盒组分
操作步骤
1.准备CoA标准库存解决方案:
将200μlddH2O加入CoA标准小瓶(组分C)中以制备1mM(1nmol / L)储备溶液。
注意1:强烈建议使用已用氮气喷射的ddH2O去除氧气,以制备辅酶A原液。
注意2:水溶液不稳定,会迅速降解。 应储存在2-8℃,并在1天内使用。
2.准备100X CoA Green 原液:
将100μLDMSO(组分D)加入到小瓶CoA Green (组分A)中以制备100X储备溶液。
注意:未使用的CoA Green 原液应分成一次性使用的等分试样,保存在-20℃并避光。
3.准备CoA Assay混合物:
将50L 100X CoA Green 储备溶液(来自步骤2)加入5mL测定缓冲液(组分B)中,并充分混合。
4.准备CoA标准品的连续稀释液(0至30μM):
4.1将30μLCoA标准储备溶液(来自步骤1)加入970L测定缓冲液(组分B)中以产生30μM(30pmol / L)CoA标准品。
注意:稀释的CoA标准溶液不稳定,应在4小时内使用。
4.2取200μL30μMCoA标准溶液,用Assay缓冲液(组分B)进行1:3连续稀释,得到10,3,1,0.3,0.1,0.03,0.01和0μM连续稀释的CoA标准品。
4.3将CoA标准品和含CoA的测试样品加入到实心黑色96孔微孔板中,如说明书中的表1和2所示。
注意:根据需要处理细胞或组织样本。
5.运行CoA测定:
5.1将50μLCoA反应混合物(来自步骤3.1)添加至CoA标准品的每个孔,空白对照和测试样品(参见步骤4.3),以使总CoA测定体积为100μL/孔。
注意:对于384孔板,每孔加入25μL样品和25μLCoA反应混合物。
5.2在室温下孵育反应10分钟至1小时,避光。
5.3用荧光板读数器监测Ex / Em = 490 / 520nm处的荧光增加。
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级别 : | 超纯、高纯 |
含量 : | 95% |
产品规格 : | 200 Tests |
品牌 : | aat bioquest |
用途范围 : | AAT Bioquest生产的荧光染料 |
特色服务 : | 免费技术咨询 顺丰包邮 |
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