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操作步骤： 用于检测未知抗原的双抗体夹心法 1.　包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg／ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。（简称洗涤，下同）。 2.　加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。 3.　加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。 4.　加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。 5.　终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。

温馨说明：

1仔细阅读说明书

2确定试剂盒在有效期内 3按说明书确定所有试剂齐全（数量、体积） 4标本制备要规范，每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备（贮存），尽量分装做备份。短期内无法实验者，注意低温保存 5准备好所有实验额外所需物品，如试管、吸头、移液器、离心机等 6根据检测标本数量确定所需试剂的量 7按说明书将所用试剂平衡至室温，配制所需试剂。

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