PhosphoWorks 荧光ATP检测试剂盒

简要概述

        PhosphoWorks 荧光ATP检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测ATP的试剂盒，ATP在细胞能量，代谢调节和细胞信号传导中起着基本作用。它被称为细胞内能量转移的“货币分子单位”，以驱动活细胞中的许多过程和化学合成。 ATP也是细胞通讯的信号分子，在DNA和RNA合成中起重要作用。 AAT Bioquest提供了多种生物发光测定试剂盒，可通过重组萤火虫荧光素酶（目录号21610和21609）确定ATP的纳摩尔（nM）范围。这些试剂盒需要酶标仪，通常用于细胞活力或细胞毒性测定。 PhosphoWorks 荧光ATP分析试剂盒基于一系列ATP诱导的酶偶联反应，产生过氧化氢，该过氧化氢用我们的Amplite Red底物通过分光光度法定量。该测定法可在100 µL反应体积中检测到约0.4 µM ATP，而不受ADP和AMP的干扰。它为测定生物样品中的ATP水平提供了一种强大，简单且方便的测定方法。 PhosphoWorks 荧光ATP分析是我们基于荧光素酶的ATP分析试剂盒的补充。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的PhosphoWorks 荧光ATP检测试剂盒。

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备ATP工作溶液（50 µL）2.添加ATP标准液或测试样品（50 µL）3.在室温下孵育10-30分钟4.监测Ex / Em = 540/590 nm（截止= 570 nm）的荧光增加

溶液配制

1.制备储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。1.1Amplite 红色底物储备液（200X）：将30 µL DMSO（组分E）加入小瓶Amplite Red Substrate（组分A）中，制成200X Amplite Red Substrate储备液。

1.2ATP标准溶液（10mM）：将0.5 mL的ddH2O加入到ATP标准溶液（组分D）的小瓶中，制成10 mM ATP标准溶液。

2.制备标准溶液

ATP标准

将10 µL的10 mM ATP标准溶液添加到990 µL 1X PBS缓冲液中，以生成100 µM ATP标准溶液（AS7）。 取100 µM ATP标准溶液（AS7）并进行1：3连续稀释，以使用1X PBS缓冲液获得系列稀释的ATP标准溶液（AS6-AS1）。

3.制备工作溶液

3.1将5毫升测定缓冲液（组分C）添加到酶混合瓶（组分B）中，并充分混合。

3.2在Enzyme Mix瓶中加入25 µL 200X AmpliteTM Red Substrate储备液，充分混合以制成APT工作溶液。

样品示例及操作

表1.黑色96孔微孔板中ATP标准品和测试样品的布局。 AS = ATP标准品（AS1-AS7，0.14至100 µM），BL =空白对照，TS =测试样品。

BL	BL	TS	TS
AS1	AS1	...	...
AS2	AS2	...	...
AS3	AS3
AS4	AS4
AS5	AS5
AS6	AS6
AS7	AS7

表2.每个孔的试剂组成

孔	容积	试剂
AS1-AS7	50ul	连续稀释（0.14至100 µM）
BL	50ul	1 X PBS缓冲液
TS	50ul	测试样品

1.根据表1和2中提供的布局，准备ATP标准品（AS），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25 µL试剂，而不是50 µL。

2.将50 µL ATP工作溶液添加到ATP标准液，空白对照和测试样品的每个孔中，以使ATP总测定体积为100 µL /孔。 对于384孔板，将25 µL ATP工作溶液添加到每个孔中，总体积为50 µL /孔。

3.避光保存，室温下孵育反应10-30分钟。

4.使用荧光酶标仪在Ex / Em = 540/590 nm（截止= 570 nm）处监视荧光增加。

搜好货厂家西安百萤生物科技有限公司为您提供AAT Bioquest PhosphoWorks 荧光ATP检测试剂盒 货号21620的详细产品价格、产品图片等产品介绍信息，您可以直接联系厂家获取AAT Bioquest PhosphoWorks 荧光ATP检测试剂盒 货号21620的具体资料，联系时请说明是在搜好货网看到的。