大鼠脂蛋 磷脂酶A2试剂盒 Lp PLA2 elisa试剂盒 仑昌硕生物

仑昌硕生物      大鼠脂蛋白*脂酶A2（Lp-PLA2）elisa试剂盒

以避免液体蒸发;洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同 时应严格遵守给定的孵育时间和温度.4. 洗涤:洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,勿将滤纸直接放入反应孔 中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响最后的酶标仪读数.5. 试剂配制:Detection A 及 Detection B 在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或 瓶盖的液体沉积到管底.标准品,检测溶液 A 工作液,检测溶液 B 工作液请依据所需的量 配置使用,并使用相应的稀释液配制,不能混淆.请精确配置标准品及工作液,尽量不要 微量配置(如吸取检测溶液 A 时,一次不要小于 10μl),以避免由于不准确稀释而造成的 浓度误差;请勿重复使用已稀释过的标准品,检测溶液 A 工作液或检测溶液 B 工作液.6. 反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔 10 分钟),如颜 色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数.7. 底物:底物请避光保存,在储存和温育时避免强光直接照射. 建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性. 如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请最后乘以稀释倍数.

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1、使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC)，试剂不能直接在37℃溶解。2、标准品(冻干品)：每瓶标准品加入标准品稀释液1mL，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为 10,000pg/mL(贮液)。先将其稀释为5,0000pg/mL(标准曲线最高浓度)后，再准备7个稀释标准品的EP管，每个EP管中加入500μL的标准品稀释液，依次倍比稀释成 5,000pg/mL，2,500pg/mL，1,250pg/mL，625pg/mL，312pg/mL，156pg/mL，78pg/mL，标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。3、检测溶液A及检测溶液B：Detection A 及Detection B 在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。临用前分别以检测稀释液 A 或 B1:100 稀释(如：10μL 检测溶液 A/990μL 检测稀释液 A)，充分混匀，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100μL/孔)，实际配制时应多配制0.1-0.2mL。4、浓洗涤液：用 580mL 蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL，进行30倍稀释。

 

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  背景及目的: 代谢综合征(Metabolic syndrome,Mets)的主要特点是胰岛素抵抗,高血压,中心型肥胖及高脂血症,其发病率逐年升高且发病年龄趋于年轻化;代谢综合征患者发生血栓栓塞性疾病及相关并发症的概率明显高于正常人群,但其具体发病机制尚未明确.代谢综合征患者体内抵抗素(Resistin,Re)水平明显升高.本课题组前期在体实验发现肥胖小鼠体内抵抗素水平升高,升高的抵抗素可促进小鼠静脉血栓的形成,同时肥胖大鼠体内纤溶酶原激活剂抑制物-1(Plasminogen activator inhibitor1,PAI-1)水平也升高.紧接着本课题组前期体外实验发现抵抗素能促进内皮细胞PAI-1表达水平的升高.因此,综合体内外实验,我们推测抵抗素促进血栓形成的过程可能与PAI-1有一定的关系.本研究通过PAI-1单克隆抗体(PAI-1Ab)抑制PAI-1蛋白活性,观察外源性抵抗素作用后血栓的变化情况,直接验证PAI-1在抵抗素促进小鼠静脉血栓形成中的作用. )抵抗素组大鼠下腔静脉PAI-1mRNA表达水平高于盐水组(P<0.01),抵抗素+PAI-1Ab组大鼠下腔静脉PAI-1mRNA表达水平高于盐水+PAI-1Ab组(P<0.01). (5)抵抗素组大鼠下腔静脉血栓内纤维蛋白含量明显多于盐水组,抵抗素+PAI-1Ab组大鼠下腔静脉血栓内纤维蛋白含量明显少于抵抗素组,盐水+PAI-1Ab组血栓纤维蛋白含量少于盐水组. 结论: 抵抗素可增加大鼠深静脉血栓重量及长度,促进血栓形成.抵抗素可升高大鼠下腔静脉内皮PAI-1mRNA及血浆PAI-1蛋白水平.抑制PAI-1可减弱抵抗素的促进深静脉血栓形成作用,提示抵抗素促进血栓形成部分是通过PAI-1发挥作用

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