兔Ⅲ型前胶原氨基N端肽试剂盒 PⅢN Pelisa试剂盒 仑昌硕生物

仑昌硕生物            兔Ⅲ型前胶原氨基N端肽（PⅢN P）elisa试剂盒

 

背景及目的: 代谢综合征(Metabolic syndrome,Mets)的主要特点是胰岛素抵抗,高血压,中心型肥胖及高脂血症,其发病率逐年升高且发病年龄趋于年轻化;代谢综合征患者发生血栓栓塞性疾病及相关并发症的概率明显高于正常人群,但其具体发病机制尚未明确.代谢综合征患者体内抵抗素(Resistin,Re)水平明显升高.本课题组前期在体实验发现肥胖小鼠体内抵抗素水平升高,升高的抵抗素可促进小鼠静脉血栓的形成,同时肥胖大鼠体内纤溶酶原激活剂抑制物-1(Plasminogen activator inhibitor1,PAI-1)水平也升高.紧接着本课题组前期体外实验发现抵抗素能促进内皮细胞PAI-1表达水平的升高.因此,综合体内外实验,我们推测抵抗素促进血栓形成的过程可能与PAI-1有一定的关系.本研究通过PAI-1单克隆抗体(PAI-1Ab)抑制PAI-1蛋白活性,观察外源性抵抗素作用后血栓的变化情况,直接验证PAI-1在抵抗素促进小鼠静脉血栓形成中的作用. )抵抗素组大鼠下腔静脉PAI-1mRNA表达水平高于盐水组(P<0.01),抵抗素+PAI-1Ab组大鼠下腔静脉PAI-1mRNA表达水平高于盐水+PAI-1Ab组(P<0.01). (5)抵抗素组大鼠下腔静脉血栓内纤维蛋白含量明显多于盐水组,抵抗素+PAI-1Ab组大鼠下腔静脉血栓内纤维蛋白含量明显少于抵抗素组,盐水+PAI-1Ab组血栓纤维蛋白含量少于盐水组. 结论: 抵抗素可增加大鼠深静脉血栓重量及长度,促进血栓形成.抵抗素可升高大鼠下腔静脉内皮PAI-1mRNA及血浆PAI-1蛋白水平.抑制PAI-1可减弱抵抗素的促进深静脉血栓形成作用,提示抵抗素促进血栓形成部分是通过PAI-1发挥作用

 

  

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可同时中国又是人口大国,这就导致了中国人均占有的畜产品数量还依然很少.然而伴随着人们生活水平的逐渐提高,对畜产品尤其是优质的肉类产品的需求越来越高,这就要求研究者们进一步研究出高产量,高品质的畜产品.肌生成抑制素(Myostatin,MSTN),又称GDF-8,是TGF-β超家族的成员之一,是骨骼肌生长的负调控因子,因其与"双肌性状"关系密切而被广泛关注,该基因的缺失或突变能够引起所编码的蛋白质失活,进而消除其对骨骼肌生长的抑制作用,导致其不能调节肌纤维的降解活动造成肌肉的增生和肥大.由此看来,Myostatin基因与家畜的肉质和胴体性状密切相关.本实验主要研究肌生成抑制素Myostatin基因的融合表达质粒对小鼠肌肉增殖能力的影响. 本实验首先利用巢式PCR的方法扩增出肌生成抑制素Myostatin基因的编码区,并将该片段连入到乙肝表面抗原HBsAg基因的3'末端,用以增加其免疫原性.而后将其连接到真核表达载体pEF1α-IRES-DsRed-Express2上,成功得到肌生成抑制素与乙肝表面抗原融合表达质粒pEF1α-DsRed-S-MSTN.将该融合质粒转染到牛胎儿成肌细胞中,利用荧光定量PCR技术以及western blot技术检测得知,该真核表达载体能够在牛胎儿成肌细胞中表达.而后,又以3周龄的昆明小鼠为实验对象,用基因免疫的方法检验该融合质粒对小鼠肌肉增殖能力的影响.实验结果表明,用ELISA检测免疫后小鼠血清内生长激素和甘油三酯水平可知,在9周龄时实验组小鼠生长激素高于对照组,且其后又继续有升高趋势.以期进一步可以为高肌肉产量肉牛的培育做出一定的贡献,但是更复杂具体的调控作用还需要进一步的实验研究.

 

 

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为了探讨肌肉质量负调控因子肌肉生长抑制素(myostatin)在低氧和运动调控骨骼肌质 量中的作用,将SD大鼠分为常氧对照组,常氧运动组,低氧暴露即刻组,高住低训即刻组,低氧暴露复氧1周组,高住低训复氧1周组.运动方式为跑台运动.采 用人工模拟氧浓度13.6%的低氧环境进行间歇性低氧暴露,每天晚上在氧浓度13.6%低氧舱内低氧暴露12h,共4周,实验后取腓肠肌称重,采用RT- PCR方法测定腓肠肌myostatin mRNA的表达.结果表明:1)与常氧对照组比,高住低训即刻组体重显著下降,腓肠肌质量显著下降(P〈0.05);2)与常氧对照组比,常氧运动组骨骼 肌myostatin mRNA表达明显上升(P〈0.05);3)4周低氧暴露后骨骼肌myostatin mRNA表达明显上升(P〈0.05),复氧1周后被完全抑制;4)4周高住低训后骨骼肌myostatin mRNA表达明显上升(P〈0.05),复氧1周后被完全抑制.高住低训后骨骼肌质量丢失,myostatin mRNA表达上升.提示高住低训调节骨骼肌质量可能与运动,低氧调控骨骼肌myostatin水平有关.

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