小鼠周期素依赖性激酶抑制因子1A试剂盒 CDKN1Aelisa试剂盒 仑昌硕生物

仑昌硕生物  小鼠周期素依赖性激酶抑制因子1A（CDKN1A）elisa试剂盒

       

      实验原理本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中sMHC-1水平.用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入sMHC-1抗原,生物素化的抗小鼠sMHC-1抗体,HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色.TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成的黄色.颜色的深浅和样品中的sMHC-1呈正相关.用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度. 试剂盒组成及试剂配制 1. 酶联板:一块(96孔)目的研究不同剂量β淀粉样蛋白1-42片段(Aβ1-42)诱导的阿尔茨海默病(AD)小鼠模型的学习记忆功能的变化。方法在C57BL/6J小鼠双侧海马注射不同浓度的Aβ1-42各1μL诱导AD模型,并在对照组注射等量溶剂(生理盐水)。注射7天后,应用水迷宫(MWM)对小鼠进行学习和记忆功能的测定。

 

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        本发明属于免疫学和生物技术领域,本发明提供了一种小鼠源性可溶型CD74蛋白的ELISA检测试剂盒及其检测方法.本发明的试剂盒可准确检测小鼠体液中的可溶型CD74蛋白的含量,结果由酶标仪定量分析,排除了免疫组化,免疫荧光,Westernblot等半定量方法的主观性;而且灵敏度高,检测到的CD74蛋白可至781.25pg/ml;本发明检测时不需要复杂仪器,易于在科研院校和医疗机构中推广应用,可大规模检测基础研究生物标本,快速获得小鼠CD74蛋白相关的海量数据和信息.结果与对照组相比,低剂量Aβ1-42(1μg/μL)处理对小鼠学习记忆功能未产生显著影响;而高剂量Aβ1-42(5μg/μL)处理组与对照组比较,潜伏期明显延长(P〈0.05)、周边活动时间百分比增加(〈0.05)、平台象限活动时间百分比减少(P〈0.05)、平台穿越次数减少(P〈0.05)。

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         目的:探讨Aβ42及其亚单位肽疫苗接种小鼠后特异性抗Aβ42抗体的产生情况.方法:75只6 wk龄雄性BALB/c小鼠,随机分为5组:即对照组、Aβ42组,Aβ36-42组、Aβ1-15组和FAβ1-15组.分别用PBS+MF59佐剂,Aβ42+MF59,Aβ36-42+七聚赖氨酸(MAP)+MF59,Aβ1-15+MAP+MF59,Aβ1-15+MAP+福氏佐剂,免疫BALB/c小鼠4次.用间接ELISA法,检测各组免疫小鼠血清和脑组织匀浆上清液中特异性抗体的滴度.将Aβ42、Aβ36-42和Aβ1-15与培养的PC12细胞共同培养7 d,用MTT比色法检测3种抗原肽对PC12细胞的毒性.将各组免疫小鼠的血清加入到含20 mg/L Aβ42的培养基中,再与培养的PC12细胞一起培养7 d,用MTT比色法测定PC12细胞的存活率.结果:第2次免疫后,各实验组小鼠的免疫血清均有抗Aβ42抗体产生,且抗体滴度随接种次数的增多而增高.同时,在脑组织匀浆上清液中也可检测出低滴度的抗Aβ42抗体.Aβ42可降低PC12细胞的存活率;而不同浓度的Aβ36-42和Aβ1-15则对PC12细胞的存活率无显著影响.将4组疫苗免疫血清和20 mg/L Aβ42同时加入培养基中培养PC12细胞时,可显著提高其存活率.结论:Aβ42及其亚单位疫苗(Aβ1-15及Aβ36-42)结合MF59佐剂免疫BALB/c小鼠后,均可诱导小鼠产生特异性的抗Aβ42抗体,并能中和Aβ42的毒性作用.

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