人钙激活中性蛋白酶1试剂盒 CAPN1 elisa试剂盒 仑昌硕生物

仑昌硕生物  人钙激活中性蛋白酶1（CAPN1）elisa试剂盒   

厦门仑昌硕生物科技有限公司集研发、生产、销售、服务及品牌代理为一体的生物技术公司，目前可提供各种抗体、免疫学相关的检测试剂盒、胎牛血清，动物抗血清等高品质产品及服务，涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学领域。公司非常注重企业信息化的建设及企业平台的建设，我们内部采用了先进的信息处理平台，保证客户的需求可以准确、有效处理。公司成立之初，立足外贸，和部分欧美及亚非国的客户建立了良好的合作，随着国内生物领域的蓬勃发展，逐步把重心转移到国内来，为每位科研人员献上高品质的产品及服务是我们的使命。

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 1. 包被抗原：用包被液将抗原作适当稀释, 一般为1～10微克/孔，每孔加200微升，37℃温育1小时后，4℃冰箱放置16～18小时。

 2. 洗涤：倒尽板孔中液体，加满洗涤液，静放三分钟，反复三次，将反应板颠倒在吸水纸上，使孔中洗涤液流尽。

3. 加封闭液200微升，37℃放置一小时。

4. 洗涤同2。

5. 加被检血清：用稀释液将被检血清作几种稀释,，每孔200微升。同时作稀释液对照。37℃放置2小时。

6. 洗涤同2。

7. 加辣根过氧化物酶羊抗兔IgG, 每孔200微升, 放置37℃ 1小时。

8. 洗涤同2。

9. 加底物：邻*二胺溶液加200ml，室温暗处10--15分钟。

10. 加终止液：每孔50微升。

11. 观察结果：用酶联免疫检测仪记录450nm读数。

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本研究旨在探讨S100钙结合蛋白A16 (S100 calcium binding protein A16, S100A16)在肝细胞脂质代谢中的作用及可能的生物学机制.用脂肪酸培养HepG2细胞(人肝癌细胞系)以建立脂肪酸培养模型,对照模型不加脂肪酸培养,每一模型分成3组细胞,分别用S100a16过表达质粒,shRNA质粒,Vector质粒转染.用试剂盒检测细胞甘油三酯浓度,用油红O染色观察脂滴聚集情况,用免疫沉淀和质谱分析寻找和S100A16相互作用的兴趣蛋白,并用免疫共沉淀验证,用Western blot和qRTPCR进行相关机制研究.结果显示,和对照模型相比,脂肪酸培养模型细胞内脂肪和甘油三酯浓度显著增加.S100a16过表达组细胞内脂肪积累显著高于Vector质粒转染组.热休克蛋白A5 (heat shock protein A5, HSPA5)与S100A16之间存在相互作用.S100a16过表达可上调内质网应激的HSPA5/肌醇依赖酶1α-X结合蛋白1 (inositol-requiring enzyme 1α-X binding protein 1,IRE1α-XBP1)通路相关蛋白(HSPA5,IRE1α和pIREα1)表达水平,并上调脂肪合成相关基因Srebp1c,Acc和Fas mRNA表达水平,而转染S100A16 shRNA质粒可使上述蛋白和mRNA水平低于Vector质粒转染组.以上结果提示,S100A16可能通过内质网应激HSPA5/IRE1α-XBP1通路促进HepG2细胞脂合成.

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  厦门仑昌硕生物科技有限公司 本公司集研发、生产、销售、服务及品牌代理为体的生物技术公司，目可提供各种抗体、免疫学相关的检测试剂盒、胎牛血清、动物抗血清等高品质产品及服务，涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学域。公司非常注重企业信息化的建设及企业平台的建设，我们内部采用了先进的信息处理平台，保证客户的需求可以准确、有效处理。公司成立之初，立足外贸，和部分欧美及亚非国家的客户建立了良好的合作，随着国内生物域的蓬勃发展，逐步把重心转移到国内来，为每位科研人员献上高品质的产品及服务是我们的使命。

 

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