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福建省厦门市
仑昌硕生物 绵羊表皮生长因子(EGF)elisa试剂盒
可同时中国又是人口大国,这就导致了中国人均占有的畜产品数量还依然很少.然而伴随着人们生活水平的逐渐提高,对畜产品尤其是优质的肉类产品的需求越来越高,这就要求研究者们进一步研究出高产量,高品质的畜产品.肌生成抑制素(Myostatin,MSTN),又称GDF-8,是TGF-β超家族的成员之一,是骨骼肌生长的负调控因子,因其与"双肌性状"关系密切而被广泛关注,该基因的缺失或突变能够引起所编码的蛋白质失活,进而消除其对骨骼肌生长的抑制作用,导致其不能调节肌纤维的降解活动造成肌肉的增生和肥大.由此看来,Myostatin基因与家畜的肉质和胴体性状密切相关.本实验主要研究肌生成抑制素Myostatin基因的融合表达质粒对小鼠肌肉增殖能力的影响. 本实验首先利用巢式PCR的方法扩增出肌生成抑制素Myostatin基因的编码区,并将该片段连入到乙肝表面抗原HBsAg基因的3'末端,用以增加其免疫原性.而后将其连接到真核表达载体pEF1α-IRES-DsRed-Express2上,成功得到肌生成抑制素与乙肝表面抗原融合表达质粒pEF1α-DsRed-S-MSTN.将该融合质粒转染到牛胎儿成肌细胞中,利用荧光定量PCR技术以及western blot技术检测得知,该真核表达载体能够在牛胎儿成肌细胞中表达.而后,又以3周龄的昆明小鼠为实验对象,用基因免疫的方法检验该融合质粒对小鼠肌肉增殖能力的影响.实验结果表明,用ELISA检测免疫后小鼠血清内生长激素和甘油三酯水平可知,在9周龄时实验组小鼠生长激素高于对照组,且其后又继续有升高趋势.以期进一步可以为高肌肉产量肉牛的培育做出一定的贡献,但是更复杂具体的调控作用还需要进一步的实验研究.
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ELISA常用的四种方法
1.直接法测定抗原
将抗原吸附在载体表面;
加酶标抗体,形成抗原-抗体复合物;
加底物。底物的降解量=抗原量。
2.间接法测定抗体
将抗原吸附于固相载体表面;
加抗体, 形成抗原-抗体复合物;
加酶标抗体;
加底物。 测定底物的降解量=抗体量。
3.双抗体夹心法测定抗原
将抗原免疫动物获得的抗体吸附于固相表面;
加抗原,形成抗原-抗体复合物;
加抗原免疫种动物获得的抗体,形成抗体抗原抗体复合物;
加酶标抗抗体(种动物抗体的抗体);
加底物。底物的降解量=抗原量。
4. 竞争法测定抗原
将抗体吸附在固相载体表面;
(1) 加进酶标抗原;
(2),(3)加进酶标抗原和待测抗原;
加底物。对照孔与样品孔底物降解量的差=未知抗原量。
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1. 包被抗原:用包被液将抗原作适当稀释, 一般为1~10微克/孔,每孔加200微升,37℃温育1小时后,4℃冰箱放置16~18小时。
2. 洗涤:倒尽板孔中液体,加满洗涤液,静放三分钟,反复三次,将反应板颠倒在吸水纸上,使孔中洗涤液流尽。
3. 加封闭液200微升,37℃放置一小时。
4. 洗涤同2。
5. 加被检血清:用稀释液将被检血清作几种稀释,,每孔200微升。同时作稀释液对照。37℃放置2小时。
6. 洗涤同2。
7. 加辣根过氧化物酶羊抗兔IgG, 每孔200微升, 放置37℃ 1小时。
8. 洗涤同2。
9. 加底物:邻*二胺溶液加200ml,室温暗处10--15分钟。
10. 加终止液:每孔50微升。
11. 观察结果:用酶联免疫检测仪记录450nm读数。
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厦门仑昌硕生物科技有限公司集研发、生产、销售、服务及品牌代理为体的生物技术公司,目可提供各种抗体、免疫学相关的检测试剂盒、胎牛血清、动物抗血清等品质产品及服务,涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学域。公司非常注重企业信息化的建设及企业平台的建设,我们内部采用了先进的信息处理平台,保证客户的需求可以准确、处理。公司成立之初,立足外贸,和部分欧美及亚非国家的客户建立了良好的合作,随着国内生物域的蓬勃发展,逐步把重心转移到国内来,为每位科研人员献上高品质的产品及服务是我们的使命。
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分类 : | 实验试剂 |
级别 : | 试验试剂LR |
含量 : | 1 |
产品规格 : | 96T |
CAS : | 原装 ,有质量问题包退换 |
品牌 : | 仑昌硕生物 |
用途范围 : | 仅供科研使用 |
特色服务 : | 准确性好 灵敏度高 |
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