猪血管内皮细胞粘附分子3试剂盒 VCAM3elisa试剂盒 仑昌硕生物

仑昌硕生物     猪血管内皮细胞粘附分子3（VCAM-3）elisa试剂盒

可同时中国又是人口大国,这就导致了中国人均占有的畜产品数量还依然很少.然而伴随着人们生活水平的逐渐提高,对 畜产品尤其是优质的肉类产品的需求越来越高,这就要求研究者们进一步研究出高产量,高品质的畜产品.肌生成抑制素(Myostatin,MSTN),又称GDF-8,是TGF-β超家族的成员之一,是骨骼肌生长的负调控因子,因其与"双肌性状"关系密切而被广泛关注,该基因的缺失或突变能够引起所编码的蛋白质失活,进而消除其对骨骼肌生长的抑制作用,导致其不能调节肌纤维的降解活动造成肌肉的增生和肥大.由此看来,Myostatin基因与家畜的肉质和胴体性状密切相关.本实验主要研究肌生成抑制素Myostatin基因的融合表达质粒对小鼠肌肉增殖能力的影响. 本实验首先利用巢式PCR的方法扩增出肌生成抑制素Myostatin基因的编码区,并将该片段连入到乙肝表面抗原HBsAg基因的3'末端,用以增加其免疫原性.而后将其连接到真核表达载体pEF1α-IRES-DsRed-Express2上,成功得到肌生成抑制素与乙肝表面抗原融合表达质粒pEF1α-DsRed-S-MSTN.将该融合质粒转染到牛胎儿成肌细胞中,利用荧光定量PCR技术以及western blot技术检测得知,该真核表达载体能够在牛胎儿成肌细胞中表达.而后,又以3周龄的昆明小鼠为实验对象,用基因免疫的方法检验该融合质粒对小鼠肌肉增殖能力的影响.实验结果表明,用ELISA检测免疫后小鼠血清内生长激素和甘油三酯水平可知,在9周龄时实验组小鼠生长激素高于对照组,且其后又继续有升高趋势.以期进一步可以为高肌肉产量肉牛的培育做出一定的贡献,但是更复杂具体的调控作用还需要进一步的实验研究.

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目的 探讨趋化因子干扰素诱导蛋白10(IP-10)在系统性红斑狼疮(SLE)患者血清中的表达水平及其对SLE的临床诊断价值.方法 采用ELISA法检测96例SLE患者以及30例正常对照组血清中IP-10表达水平,比较分析其与SLE病情活动指数(SLEDAI评分)、疾病活动性指标抗双链DNA(dS-DNA)抗体、抗C1q抗体、补体C3、C 4水平、24 h尿蛋白定量(24 h UPQ)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、红细胞沉降率(ESR)的相关性,以及通过检测Th1型细胞因子干扰素γ(IFN-γ)和Th2型细胞因子白介素-4(IL-4)来判断其在调节炎症免疫反应中的作用.结果 总体SLE患者IP-10水平显著高于正常对照组,疾病活动狼疮*炎(LN)组IP-10水平明显高于疾病活动非*损伤组和疾病稳定组,差异有统计学意义(P<0.01),而疾病稳定LN组与疾病活动无*损伤组间IP-10水平差异无统计学意义.在疾病活动期中,IP-10水平与SLEDAI评分、dS-DNA、hs-CRP呈明显正相关(P<0.01),与C3呈负相关(P<0.01),与C 4、24 h UPQ、ESR无相关性,而在SLE*损伤中,无论是活动期还是稳定期IP-10水平均和C1q呈正相关(P<0.05);SLE患者中IFN-γ、IL-4水平均明显高于正常对照组,IP-10与IFN-γ水平及IL-4/IFN-γ比值在疾病活动和稳定时均呈正相关(P<0.01),而与IL-4仅在疾病稳定时呈正相关(P<0.01).结论 IP-10通过介导Th1型炎症免疫反应在SLE中发挥重大作用,其表达水平与SLE疾病活动性密切相关,尤其对狼疮*炎及狼疮活动的早期监测具有重要意义.

 

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 1. 包被抗原：用包被液将抗原作适当稀释, 一般为1～10微克/孔，每孔加200微升，37℃温育1小时后，4℃冰箱放置16～18小时。

 2. 洗涤：倒尽板孔中液体，加满洗涤液，静放三分钟，反复三次，将反应板颠倒在吸水纸上，使孔中洗涤液流尽。

3. 加封闭液200微升，37℃放置一小时。

4. 洗涤同2。

5. 加被检血清：用稀释液将被检血清作几种稀释,，每孔200微升。同时作稀释液对照。37℃放置2小时。

6. 洗涤同2。

7. 加辣根过氧化物酶羊抗兔IgG, 每孔200微升, 放置37℃ 1小时。

8. 洗涤同2。

9. 加底物：邻*二胺溶液加200ml，室温暗处10--15分钟。

10. 加终止液：每孔50微升。

11. 观察结果：用酶联免疫检测仪记录450nm读数。

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