HKE035-01B 2×Fast Pfu Ma-ster Mix 1ml×5 环凯微生物

产品名称：2×Fast Pfu Master Mix中文名称：2倍快速Pfu梅预混液

产品编号与包装规格：

编号	产品名称	规格	产品介绍	产品价格
HKE035-01B	2×Fast Pfu Master Mix	1ml×5	2倍快速Pfu梅预混液

产品描述：本制品是将PCR反应所需的Fast Pfu梅、dNTPs、MgCl2、反应缓冲夜以及优化剂以及稳定剂，预先配制成2倍浓度的混合物。2×Fast Pfu Master Mix专为扩增克龙DNA片段优化，高保真，错误率仅为1.3×10-6。使用时只需在加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应，非常方便。较普通Pfu梅，2×Fast Pfu Master Mix具有快速、高灵敏度、抗干扰强等特点，能获得更理想的扩增结果， 并大幅度缩短扩增反应时间，非常适用于1-20kb长片段的扩增。

产品特点：      高保真：具有同Pfu梅相同的保真度，为普通Taq酶的50倍。      灵敏：可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段。      快速高效：Fast Pfu扩增速度为普通Pfu梅的数倍，72℃保温30 秒可延伸1kb以上，可在较短时间内获得高产量的PCR产物（图例一）。      快捷：PCR反应所必需试剂全集于一管之中，数分钟即可完成反应体系配制。

产品用途：用于要求保真度比较高，扩增长度较长的PCR反应，包括克龙PCR、DNA片段拼接、引入突变、全基因合成等。

使用建议：（Fast Pfu DNA聚合酶产生的PCR产物为平滑末端，无3′端"A" 突出，除使用环凯PCR一步定向克龙试剂盒（Cat. No: HKNR001） 外，其它PCR产物的克龙方案有：）      1)PCR前引物进行5′端加磷修饰或将PCR产物麟酸化处理后再直接克龙于平滑末端的载体中。      2)将产物3′末端加A后再与T载体连接。      3)由于Fast Pfu DNA聚合酶的校对活性可引起引物从3′端被部分降解。因此在设计引物时应适当增加引物的长度， 理想的引物长度为20-30mers。另外为了减少由3′→5′外切酶活性引起的引物降解，尽量在冰上配制反应体系。

应用实例：图例一）50μL 扩增体系中，λDNA 为模板， 扩增 1kb~20kb 片段。

    泳道 M：λ/Hind III DNAMarker； 泳道 1：1kb；泳道 2：2kb；泳 道 3：4kb； 泳 道 4：6kb； 泳道 5：8kb；泳道 6：10kb； 泳道 7：12kb；泳道 8：20kb。

保存温度：-20℃。

产品包装（A 包装）：

质量保证：经检测无外源核酸酶残留；qPCR方法检测无大肠杆菌DNA残留；能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。

常用反应体系（50μL）：

常用PCR 循环：

注意事项：      1)需溶解完全后使用，防止离子浓度不均匀。      2)对高GC含量模板，建议将变性温度提高到98℃。      3)对于高GC模板，建议配套使用PCR万能增强剂 I（Cat.No: HKE055）或者添加终浓度为5%-8% DMSO。

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