微生物限度检测仪 内置隔膜泵 CYW-300B 薄膜过滤器 不锈钢6联 ​​

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5.试验结果5.1产品试验组微生物生长检查情况： 批号：5.2供试品对照组微生物生长检查情况： 批号：5.3稀释剂对照组微生物生长检查情况： 批号：5.4菌液组微生物生长检查情况： 批号：6.回收率计算6.1稀释剂对照组菌回收率表中：回收率=稀释剂对照组的平均菌落数÷菌液组的平均菌落数。6.2试验组菌回收率表中：回收率=（试验组的平均菌落数－供试品对照组的平均菌落数）÷菌液组的平均菌落数。7.结论：7.1经过验证，大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、黑曲霉的回收率分别为 %、 %、 %、 %、 %。7.2稀释剂回收率为 %、 %、 %、 %、 %。以上验证结果证明，本品 采用上述方法进行微生物限度检查。检验人： 复核人：8.验证结果评价分析质控部负责各项验证、试验结果记录，验证小组根据验证、试验结果进行评价，起草验证报告，报验证委员会。验证委员会负责对验证结果进行综合评审，做出验证结论，发放验证证书。对验证结果的评审应包括：（1） 验证试验是否有遗漏；（2） 验证实施过程中对验证方案有改，修改原因、依据以及是否经过批准；（3） 验证记录是否完整；（4） 验证试验结果是否符合标准要求，偏差及对偏差的说明是否合理，是否需进一步补充试验。9.*终审批验证报告由验证组长审核后，报验证总负责人批准，并签发验证证书。验证报告年 月 日至 年 月 日，验证小组根据批准的微生物限度检查方法（薄膜过滤法）验证文件对微生物限度检查法进行了相关的一系列验证工作，达到了预期效果，滋将有关事项说明如下：1、 验证方案在实施过程中未做修改。2、 验证方案各项性能指标在验证中未作变动，误差在允许范围内。3、 验证过程中结果符合规定要求，记录完整属实。4、 验证结果符合设计要求和GMP原则要求，可以投入使用。5、 组分或检验条件改变时须重新验证。以上情况，请验证委员会审批！

2.5 平板菌落计数法　　这是一种常用的活菌计数法。将待测菌液进行梯度稀释，取体积的稀释菌液与合适的固体培养基在凝固前均匀混合，或将菌液涂布于已凝固的固体培养基平板上。保温培养后，用平板上出现的菌落数乘以菌液稀释度，即可算出原菌液的含菌数。一般以直径9 cm的平板上出现50~500个菌落为宜。但方法比较麻烦，操作者需有熟练的技术。平板菌落计数法不仅可以得出菌液中活菌的含菌数，而且同时将菌液中的细菌进行了一次分离培养，获得了。　　2.6 试剂纸　　在平板计数法的基础上，发展了小型商品化产品以供快速计数用。形式有小型厚滤纸片，琼脂片等。在滤纸和琼脂片中吸有合适的培养基，其中加入活性指示剂2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑（TTC，无色）待蘸取测试菌液后置密封包装袋中培养。短期培养后在滤纸上出现密度的玫瑰色微小菌落与标准纸色板上图谱比较即可估算出样品的含菌量。试剂纸法计数快捷准确，相比而言避免了平板计数法的人为操作误差。　　2.7 膜过滤法　　用特殊的滤膜过滤体积的含菌样品，经丫叮橙染色，在紫外显微镜下观察细胞的荧光，活细胞会发橙色荧光，而死细胞则发绿色荧光。　　3. 间接测定法　　微生物的生长伴随着一系列生理指标发生变化，例如酸碱度，发酵液中的含氮量，含糖量，产气量等，与生长量相平行的生理指标很多，它们可作为生长测定的相对值。因此可利用生理指标等间接参数来测定生物量。　　3.1 测定含氮量　　大多数细菌的含氮量为干重的12.5%，酵母为7.5%，霉菌为6.0%。根据含氮量×6.25，即可测定粗蛋白的含量。含氮量的测定方法有很多，等消化法和Dumas测N2气法。Dumas测N2气法是将样品与CuO混合，在CO2气流中加热后产生氮气，收集在呼吸计中，用KOH吸去CO2后即可测出N2的量。　　3.2 测定含碳量　　将少量（干重0.2~2.0 mg）生物材料混入1 mL水或无机缓冲液中，用2 mL 2%的K2Cr2O7溶液在100 ℃下加热30分钟后冷却。加水稀释至5 mL，在580 nm的波长下读取吸光光度值，即可推算出生长量。需用试剂做空白对照，用标准样品做标准曲线。　　还原糖测定法　　还原糖通常是指单糖或寡糖，可以被微生物直接利用，通过还原糖的测定可间接反映微生物的生长状况，常用于大规模工业发酵生产上微生物生长的常规监测。方法是，离心发酵液，取上清液，加入斐林试剂，沸水浴煮沸3分钟，取出加少酸化，加入Na2S2O3临近终点时加入淀粉溶液，继续加Na2S2O3至终点，查表读出还原糖的含量。　　3.4 氨基氮的测定　　离心发酵液，取上清液，加入甲基红和作指示剂，加入0.02 mol/L的NaOH调色至颜色刚刚褪去，加入底物18%的中性甲醛，反应数刻，加入0.02 mol/L的使之变色，根据NaOH的用量折算出氨基氮的含量。根据培养液中氨基氮的含量，可间接反映微生物的生长状况。

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