荧光量子产率测定试剂盒 适合于生物偶联基团

货号	20	存储条件	f/l
规格	1 kit
Ex (nm)		Em (nm)
分子量		溶剂
产品详细介绍

简要概述

       荧光量子产率测定试剂盒是美国AAT Bioquest生产的荧光染料，当荧光团吸收光子时，形成能量激发态。该物种的命运是多种多样的，取决于荧光团及其周围环境的确切性质，但最终结果是失活（能量损失）并返回基态。发生的主要失活过程是荧光（通过发射光子引起的能量损失），内部转换和振动弛豫（作为向周围环境的热量的非FU射能量损失）。荧光量子产率是吸收的光子与通过荧光发射的光子的比率。换句话说，量子产率给出了激发态通过荧光而不是通过另一种非FU射机制而失活的概率。该试剂盒为生物结合物的荧光量子产率测定提供了所有必需成分。它被优化用于确定荧光蛋白缀合物，肽，核苷酸和核酸的荧光量子产率。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的荧光量子产率测定试剂盒 。 

适用仪器

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分光光度计
激发:	见表1
发射:	见表1

荧光酶标仪
激发:	见表1
发射:	见表1
推荐孔板:	纯黑色

表1.试剂盒组分在水中的量子产率和类似波长的染料的相应量子产率，供参考标准选择。

	荧光量子产率在水中的值（Φs Value）	标有以下染料或类似波长染料的缀合物（供参考标准品选择）
参考A	0.98	FAM, 6-TET, 6-HEX, 6-JOE, FITC, Cy2, Alexa Fluor® 488 和 514, iFluor 488 和 514, DyLight 488, 或发射在500±50 nm的其他染料
参考B	0.20	Cy3, Alexa Fluor 514, 532, 546 和 555, iFluor 514, 532 和 555, DyLight 555, TRITC, 或发射在550±50 nm的其他染料
参考C	0.44	Texas Red, Texas Red-X, Alexa Fluor 594, iFluor 594, California Red, DyLight 594, 或发射在600 ± 50 nm的其他染料
参考D	0.24	Cy5, Cy5.5, Cy7, Alexa Fluor 633, 647, 700 和 750, iFluor 633, 647, 700 和 750, DyLight 650, 680 和 755, 或发射在650 ± 50 nm 的其他染料

产品说明书

样品实验方案

1.使用由其储备溶液制备的稀释溶液和水性缓冲液（例如PBS或TRIS）记录所选标准品和测试样品（0.1至5μM）的吸光度光谱。2.根据吸收值选择激发波长。我们建议使用以下公式来选择所需的激发波长：     所需的激发（nm）=较短的吸收大值* - 50nm*选自参考标准品或测试样品。例如，如果您的测试样品在500 nm处具有大吸收，并且所选参考标准在490 nm处具有大吸收，则应选择440 nm（490 nm - 50 nm）作为激发波长。 3.调整所选参考标准品和测试样品的浓度，使其在选定的激发波长下具有相同的吸光度（在0.2至0.8之间）。注意：选择参考标准的等吸光点和测试样品吸收光谱可能更容易。4.使用相同的缓冲液或纯水稀释所选参考标准品和测试样品10次（必须用相同比例稀释）。5.使用可以产生校正荧光光谱的荧光分光光度计或酶标仪在10mm荧光比色皿中记录相同稀释溶液的荧光光谱。注意：必须使用相同的仪器设置记录所有荧光光谱。更改样品之间的仪器设置将使量子产率测量无效。  数据分析

1.从完全校正的荧光光谱计算积分荧光强度（荧光光谱的面积）（参见仪器说明书）。

2.使用以下等式计算荧光量子产率：Φ _{- [R} =Φ _小号 * A _{- [R} / A _小号Φ _ř和Φ _小号分别被选择的参考标准和测试样品的荧光量子产率。a _r和A _s分别是所选参考标准品和测试样品的积分荧光强度（曲线面积）。

图1.荧光原理。电子被外部源激发到更高的能量水平。在返回其基态时，设定的光子量子与电子的能量损失成比例地释放。这种光子的释放代表荧光发射。荧光团的量子产率是它发射的光子与它吸收的光子的比率。

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